核酸中因?yàn)猷堰蕢A和嘧啶堿具有共軛雙鍵，所以核酸具有紫外吸收的特性，DNA鈉鹽的紫外吸收在260nm附近，其吸光率以A260表示，在230nm處于吸收低谷，因此可以使用紫外分光光度計(jì)對(duì)核酸進(jìn)行定量及定性測(cè)定。
全自動(dòng)核酸提取因其具有快速高效、簡(jiǎn)單易用以及安全無(wú)毒等特點(diǎn)迅速得到推廣應(yīng)用，成為實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)配。
核酸提取純化原則和要求
1、保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性；
2、排除其它分子的污染(如提取DNA時(shí)排除RNA的干擾)；
3、核酸樣品中不應(yīng)存在對(duì)酶有抑制作用的有機(jī)溶劑和高濃度的金屬離子；
4、盡可能降低蛋白質(zhì)、多糖和脂類(lèi)等大分子物質(zhì)；
核酸提取純化方法：
1、熱裂解堿法
堿法提取主要是利用共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒與線(xiàn)性染色質(zhì)在拓?fù)鋵W(xué)上的差異來(lái)分離他們，在堿性下，變性蛋白是可溶的。
2、煮沸裂解法
加熱處理DNA溶液，利用線(xiàn)性DNA分子的特性，通過(guò)離心將DNA段與變性蛋白質(zhì)和細(xì)胞碎片形成的沉淀分離。
3、納米磁珠法
運(yùn)用納米技術(shù)對(duì)超順磁性納米顆粒的表面進(jìn)行改良和表面修飾后，制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。該磁珠能在微觀(guān)界面上與核酸分子特異性地識(shí)別和高效結(jié)合。利用氧化硅納米微球的超順磁性，在Chaotropic鹽(鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外加磁場(chǎng)的作用下，從血液、動(dòng)物組織、食品、病原微生物等樣本中分離出DNA和RNA。
4、酚/抽提法
1956年發(fā)明，通過(guò)酚/處理細(xì)胞破碎液或者組織勻漿后，在水相中主要溶解以DNA為主的核酸成分，在有機(jī)相中主要是脂類(lèi)物質(zhì)，蛋白質(zhì)位于兩相之間。
5、醇沉淀法
乙醇能夠消除核酸的水化層，使帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)暴露出來(lái)，NA﹢等帶正電荷離子能與磷酸基團(tuán)結(jié)合，形成沉淀。
6、層析柱法
通過(guò)特殊硅基質(zhì)吸附材料，能夠特定吸附DNA，而RNA和蛋白質(zhì)順利通過(guò)，然后利用高鹽低PH結(jié)合核酸，低鹽高PH值洗脫，來(lái)分離純化核酸。
7、其他方法
除了上述常用的方法之外，還有超聲法、反復(fù)凍融法、酶解法及低滲裂解等等多種方法。
提取效率影響因素
磁珠提取由裂解、洗滌和洗脫等步驟組成，影響這些步驟的因素同樣也會(huì)影響磁珠的提取效率。
會(huì)員_a.png)